【摘要】目的 分析miR-218-5p在胃癌细胞中的表达特征,及其通过调控ERK1/2信号通路对胃癌细胞迁移、凋亡、自噬的影响。方法 以正常胃黏膜上皮细胞GES-1及胃癌细胞系AGS、MKN-45、HGC-27为研究对象,采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应 (qRT-PCR)检测miR-218-5p的相对表达水平;通过细胞转染技术构建miR-218-5p过表达 (mimics组 )、敲低 (Inhibitor组 )及相应阴性对照组,运用Transwell实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察自噬小体生成,蛋白质印迹实验检测基质金属蛋白酶 (MMP)-2、MMP-9、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达,免疫荧光实验观察p-ERK1/2的亚细胞定位。结果 与GES-1细胞相比,miR-218-5p在AGS、MKN-45、HGC-27胃癌细胞中均低表达 (P<0.001)。转染后,mimics组miR-218-5p表达升高,Inhibitor组降低 (P<0.05)。功能实验显示,过表达miR-218-5p可显著抑制MKN-45、HGC-27细胞迁移 (P<0.001),促进细胞凋亡 (P<0.05),增加自噬小体数目 (P<0.001),下调MMP-2、MMP-9蛋白表达及p-ERK1/2与ERK1/2比值 (P<0.05);敲低miR-218-5p则呈现相反效应 (P<0.05)。结论 miR-218-5p在胃癌细胞中低表达,可通过下调MMP-2/MMP-9表达及抑制ERK1/2信号通路磷酸化,发挥抑制胃癌细胞迁移、促进细胞凋亡及增强自噬的肿瘤抑制作用,有望成为胃癌潜在的生物标志物及治疗靶点。
【关键词】胃癌;miR-218-5p;细胞迁移;细胞凋亡;ERK1/2信号通路



