【摘要】目的 基于网络药理学探讨蟾毒灵抗胰腺癌的相关机制，并通过体外实验初步验证。方法 通过SITCH、CHeEMBL和Swiss Target Prediction数据库预测蟾毒灵作用靶点，使用OMIM、NCBI和GenCards数据库获得胰腺癌相关基因，并筛选2类数据库中的共同作用靶点，随后进行蛋白质-蛋白质相互作用 (PPI)网络分析，预测关键靶点蛋白。利用R语言对关键靶点进行基因本体 (GO)及京都基因与基因组百科全书 (KEGG)富集分析，预测其作用机制。将核心靶点与蟾毒灵进行分子对接，验证成分-靶点间结合的可能性，并利用体外实验验证蟾毒灵对BxPC-3和SW1990细胞的作用机制。结果 本研究共筛选出蟾毒灵抗胰腺癌102个关键靶点，GO富集分析显示靶基因主要参与肽基-酪氨酸磷酸化等生物过程，KEGG富集分析表明靶基因集中在磷脂酰肌醇3-激酶 (PI3K)-蛋白激酶B(AKT)信号通路等通路中。PPI网络识别磷脂酰肌醇激酶催化亚单位α、磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基β、磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽、非受体酪氨酸激酶及信号转导因子和转录激活因子3等核心靶点。分子对接显示蟾毒灵与核心靶点可自发结合。体外实验中，蟾毒灵以浓度依赖方式抑制BxPC-3和SW1990细胞活力和集落形成能力，并抑制其PI3K-AKT信号通路相关蛋白表达 (P＜0.05)。结论 蟾毒灵可能通过抑制PI3K-AKT信号通路活化，发挥抗胰腺癌细胞增殖的作用。

【关键词】蟾毒灵；胰腺癌；抗肿瘤作用；网络药理学；体外实验